分子雜交爐通過(guò)整合溫控技術(shù)、旋轉(zhuǎn)混勻系統(tǒng)及模塊化設(shè)計(jì),不僅提升了核酸雜交的效率和準(zhǔn)確性,還擴(kuò)展了其在基礎(chǔ)研究與臨床診斷中的應(yīng)用范圍。隨著技術(shù)迭代,未來(lái)其功能將進(jìn)一步向智能化、微型化方向發(fā)展。是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的設(shè)備,主要用于核酸分子雜交等實(shí)驗(yàn)。
分子雜交爐的測(cè)定步驟:
1.準(zhǔn)備階段
-接通電源:將電源線插入合適的插座,確保電壓符合儀器要求。然后打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),此時(shí)儀器開(kāi)始通電,顯示屏等部件亮起。
-設(shè)定參數(shù):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,通過(guò)微電腦控制系統(tǒng)或相應(yīng)的按鍵操作來(lái)設(shè)定反應(yīng)體系的加熱溫度、退火溫度和延伸溫度等參數(shù)。一般來(lái)說(shuō),恒溫范圍在室溫+5℃ -100℃,控溫精度可達(dá)±0.5℃。
-安裝雜交瓶:旋轉(zhuǎn)門鎖,打開(kāi)玻璃門,向下點(diǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)步進(jìn)開(kāi)關(guān),將雜交支架旋轉(zhuǎn)到合適位置后取出雜交瓶。
2.樣品處理與加載
-制備反應(yīng)體系:按照實(shí)驗(yàn)方案,將所需的DNA模板、引物、核酸酶、緩沖液等試劑加入反應(yīng)管中,制備好反應(yīng)體系。
-放入反應(yīng)管:將裝有反應(yīng)體系的反應(yīng)管小心地放入分子雜交爐內(nèi)的相應(yīng)位置,確保放置穩(wěn)固且不會(huì)傾倒。
3.啟動(dòng)雜交程序
-關(guān)閉艙門:確認(rèn)反應(yīng)管放置無(wú)誤后,輕輕關(guān)閉玻璃門,并鎖緊門鎖,以保證雜交過(guò)程中的溫度穩(wěn)定和環(huán)境密封。
-開(kāi)始運(yùn)行:按下啟動(dòng)按鈕,分子雜交爐將按照預(yù)設(shè)的程序開(kāi)始運(yùn)行,對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行加熱解旋、雜交等一系列操作。
4.結(jié)果檢測(cè)與分析
-信號(hào)檢測(cè):當(dāng)雜交完成后,可通過(guò)標(biāo)記在探針上的熒光染料、放射性同位素或酶等,將雜交反應(yīng)的結(jié)果轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的信號(hào)。
-數(shù)據(jù)分析:使用分子雜交儀的檢測(cè)系統(tǒng),對(duì)產(chǎn)生的信號(hào)進(jìn)行測(cè)量和分析,得出目標(biāo)分子的存在和數(shù)量等信息。